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植物組織培養實驗室常用儀器設備配置清單 | 2022-07-05 |
文章来源:由「百度新聞」平台非商業用途取用"https://new.qq.com/omn/20210913/20210913A07ZWL00.html" 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。其中動物細胞培養和植物細胞培養的環境要求也有所不同,今天東南儀誠為大家介紹植物組織培養實驗室的常用儀器配置清單和實驗室的基本操作。一、植物組織培養實驗室的構成組織培養實驗室布局的總體要求:便于隔離、便于操作、便于滅菌、便于觀察完整的組織培養室通常包括洗滌室、準備室(化學實驗室)、接種室(無菌操作室)、培養室、細胞學實驗室等部分。可以根據實際需要和條件進行設計。但從功能上至少包括準備室(化學實驗室)、接種室以及培養室三部分,并且按順序排列。在準備室與接種室之間應留有緩沖空間(或建立緩沖室)。(一)準備室(化學實驗室)1、主要功能用于培養器皿的清洗、干燥、培養基的配制、分裝和滅菌、試管苗的出瓶及整理等工作。2、主要儀器設備及用品(1)藥品柜、實驗臺、水槽藥品柜實驗臺、水槽(2)超聲波清洗儀上海知信超聲波清洗器(3)涼干架(4)干燥箱上海一恒鼓風干燥箱(5)各種玻璃器皿(燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶、三角瓶等)(6)蒸餾水制造裝置亞榮自動純水蒸餾器雷磁超純水系統(7)天平(萬分之一、百分之一)瑞士普利賽斯天平(萬分之一)上海菁華天平(百分之一)(8)移液器艾本德eppendorf移液器大龍移液器(9)pH計(不同范圍pH試紙)雷磁PHS-3C型pH計(10)水浴鍋上海知信恒溫水浴鍋(11)微波爐(12)電爐(13)磁力攪拌器大龍磁力攪拌器(14)蠕動泵及培養基分裝用品蘭格實驗室蠕動泵(15)高壓滅菌鍋上海博迅干熱滅菌器(BXH-G系列)上海博迅立式壓力蒸汽滅菌器(SII系列)(16)冰箱中科都菱低溫保存箱中科都菱超低溫保存箱接種室(無菌操作室)1、功能接種材料的滅菌、接種以及培養物的繼代轉接等。接種室要求保持潔凈,與化學實驗室之間應設置緩沖室。2、主要儀器設備及用品(1)超凈工作臺上海博迅超凈工作臺(2)紫外燈(3)小推車(4)擱架(5)瓷盤(6)接種工具各種鑷子、解剖刀、手術剪、普通剪刀、接種針、酒精燈、手持噴霧器、細菌過濾器等。(三)培養室1、功能主要用于植物材料的培養。要求室內潔凈并能保持一定的溫度、光照以及濕度,以促進植物材料的生長和分化。2、主要儀器設備及用品(1)培養架及燈管(2)搖床(振蕩器)上海智城恒溫培養振蕩器(3)空調(4)自動定時器(5)加濕及除濕器(6)光照培養箱上海智城光照培養箱(四)細胞學實驗室1、功能主要用于培養材料的顯微觀察及照相等。2、主要儀式設備及用品體視顯微鏡、普通顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、配套顯微照相裝置、普通相機或數碼相機、切片機及配套制片及染色用品等。體視顯微鏡用途:放大倍數5~80倍主要用于植物形態分化的觀察、莖尖的切取。普通光學顯微鏡用途:用于植物切片觀察,確定植物的發育進程,如:不定芽、不定胚的分化過程以及其它器官組織的分化等。倒置顯微鏡用途:主要用于細胞、原生質體的細胞分裂和細胞團形成的觀察。二、實驗室基本操作(一)洗滌1、普通器皿∶采用洗衣粉、洗潔精等中性洗滌劑洗滌。2、難清洗器皿及移液管等∶用水清洗后再用重鉻酸鉀洗液浸泡,最后清水沖洗,或用超聲波儀清洗。(二)滅菌滅菌是指用物理和化學方法殺死物體表面和內部的所有微生物(包括芽胞),使之呈無菌狀態。經過滅菌的物品稱“無菌物品”。1、器具滅菌:培養皿、解剖刀、鑷子等用品。(1)干熱滅菌:鋁箔包好后,放于恒溫干燥箱內,150℃保溫2小時,成本較高。(2)高壓蒸汽滅菌:高壓蒸汽滅菌鍋內120℃15-20分鐘。(3)灼燒滅菌:接種時,解剖刀及鑷子等浸入95%乙醇,然后取出在酒精燈火焰上灼燒殺菌。2、培養基滅菌采用高壓蒸汽滅菌。120℃15-20分鐘。培養基體積越大,滅菌時間越長。3、不耐高溫材料的滅菌采用過濾滅菌,如IAA、ZT、天然有機添加物等。4、外植體的表面滅菌(1)流水沖洗10-20分鐘或更長時間(2)70-75%酒精中浸泡30秒(3)0.1%-0.2%氯化汞液中浸泡10分鐘左右或在10%的次氯酸鈉、飽和漂泊粉浸泡30分鐘左右(4)蒸餾水沖洗4-5次(5)備用(三)無菌操作實驗員消毒、實驗室、無菌臺滅菌實驗器材滅菌無菌接種消毒實驗臺衛生培養室培養1、消毒,更換實驗服、帽子與鞋子,進入接種室。2、打開超凈工作臺和無菌操作室的紫外燈,照射40min左右,后關閉。3、開啟過濾室風機,使無菌風吹拂工作臺面和四周的臺壁。4、用70%-75%的酒精擦拭工作臺和雙手。5、用沾有70%-75%的酒精的紗布擦拭盛培養基的培養器皿,放進工作臺。6、把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95%的酒精中,再在火焰上消毒,放在器械架上。7、在酒精燈火焰附近切割備用的接種材料。8、打開瓶口,用火焰燒瓶口,轉動瓶口使瓶口部分都燒到。9、取下接種器械,在火焰上消毒。10、把培養材料放入培養瓶,蓋上瓶口。11、接種結束后,清理和關閉超凈工作臺。注意:操作期間應經常用70%-75%的酒精擦拭工作臺和雙手,接種器械應反復在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。以上設備清單僅供大家參考,具體配置需根據各位老師、使用者的實際需求策劃。下次我們會為大家介紹動物組織培養實驗室常用儀器清單及相關注意事項,希望東南儀誠的分享能對大家有所幫助。 關鍵字標籤:生物無菌操作台 |
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